【器械注册一起学9】雌激素受体、孕激素受体抗体试剂
南京西格玛医学
雌激素受体（Estrogen Receptor，ER）、孕激素受体（Progesterone Receptor，PR）抗体试剂及检测试剂盒是指利用免疫组织化学法，对病理组织切片中雌激素受体或孕激素受体进行检测的试剂。此类试剂为特异性单克隆或多克隆抗体，或抗体与显色系统、对照试剂、质控片（如有）及其它辅助试剂一同包装成试剂盒形式的检测试剂，用于乳腺癌患者的预后判断和指导用药。本指导原则所提及ER为ERα。如：孕激素受体检测试剂盒（免疫组织化学法）。按照《体外诊断试剂分类规则》，该产品按照第三类体外诊断试剂管理，分类编码为6840。
临床试验
1.临床试验机构的选择
申请人应选定不少于3家（含3家）临床试验机构开展临床试验。临床试验机构应具备相应条件，且已按照规定进行医疗器械临床试验机构备案。尽量使各临床试验机构的临床样本有一定的区域代表性。临床试验机构应具有严格的质量管理体系，执行实验室内部日常质量控制，参加国家病理以及国际病理质控机构的质控活动。
2.病例选择和样本类型
临床试验应选择已确诊为乳腺癌的患者。
临床常用样本类型为经10%中性缓冲福尔马林固定石蜡包埋乳腺癌组织样本。
3.试验方法
3.1选择已批准上市，临床普遍认为质量较好，如该抗体克隆经过国际权威机构（如NordiQC等）年度评分成绩较好的已上市同类产品，作为对比试剂。采用试验体外诊断试剂与之进行比较研究，证明本品与已上市产品等效。
计算所有检测乳腺癌样本中ER或PR阳性比例，间接验证ER及PR的检测有效性。
3.2对于第一抗体选择未经充分临床验证克隆的PR检测试剂，除满足3.1要求外，还应对不少于200例乳腺癌样本同时进行ER、PR检测，分别计算阳性比例并对出现的ER(-)/PR(+)样本，用其他合理的方法进行复核并分析原因。
3.3产品设计包括多种适用情形时，如适用于不同的样本类型（如：冰冻样本）、不同检测体系（如：配合适用的第二抗体、显色剂）、或包括不同的抗体试剂类型（如：浓缩型与即用型）等，临床试验应以一种适用情形为主，同时对其他适用情形进行一定数量与对比方法的对比试验或同源对比试验，应满足统计学要求。
3.4对于预期用途中已明确配合具体治疗药物名称的ER、PR检测试剂，应采用联合药物评价临床试验的形式，同时评价检测结果与接受治疗后临床预后的相关性和试验体外诊断试剂与对比试剂检测的一致性。
4.临床评价指标和样本量考虑
4.1临床评价指标
对于半定量产品的临床评价指标包括：各等级符合率、阴/阳性符合率及Kappa值等。此外，用试验体外诊断试剂及对比试剂阳性细胞百分比做散点图的方法，配合适当的统计分析方法，如Pearson相关分析等，计算相关系数，评价试验用体外诊断试剂与对比试剂在阳性细胞百分比上的检测一致性。
此外，应评价试验体外诊断试剂与对比试剂染色强度的一致性。
4.2样本量考虑
临床试验入组样本应覆盖产品检测范围，各个等级均应有一定例数，特别对于阳性百分比1%-10%弱阳性样本，应入组一定例数的样本。阳性符合率和阴性符合率应分别不低于90%和95%。
临床试验样本量应以临床性能得到充分评价为目标，保证目标人群的各种特征均有充分数量的代表性受试者入组，应结合产品的具体特点、统计学分析模型等因素选择适当的样本量估算方法，并在方案中明确样本量确定的依据。同时应充分考虑可能的脱落剔除率等情况，合理设定样本量要求。
5.统计学分析
对临床试验结果的统计应选择合适的统计方法，对于本类检测试剂比较研究试验的一致性研究，常选择R×C表的形式总结两种试剂的半定量检测结果，计算各等级符合率、阴性符合率、总符合率和Kappa值等指标，并选择合适的统计学方法计算95%置信区间。
用试验体外诊断试剂及对比试剂阳性细胞百分比做散点图的方法，配合适当的统计分析方法，如Pearson相关分析等，计算相关系数，评价试验用体外诊断试剂与对比试剂在阳性细胞百分比上的检测一致性。
对于本类检测试剂与对比试剂染色强度的一致性研究，结果应采用R×C列联表的形式给出，并计算不同染色强度的符合率、总符合率、Kappa值等指标，并选择合适的统计学方法计算95%可信区间。
6.结果差异样本的验证
在数据收集过程中，对两种试剂检测结果不一致的样本，应采用其他合理的方法进行复核，同时对切片的染色特点及差异产生原因进行分析。
7.质量控制
由于免疫组化试验前处理步骤较多，导致判读结果可能会在试验人员间、实验室间产生差异。为了客观单一评价试剂性能，尽量减少这种人为差异对最终结果造成的影响，临床试验开始前，各临床试验机构应进行判读一致性试验及统一的质量控制，统一操作步骤，确保同样的染色片在不同医院的判读结果保持一致。该预评估内容、实现方法、结果等应在临床试验报告中体现。
8.原始数据
8.1提交病例报告表（Case Report Form, CRF），内容应至少包括：性别、年龄、病理诊断结果、试验体外诊断试剂检测阳性细胞百分比和染色强度、对比试剂检测阳性细胞百分比和染色强度。阳性细胞百分比可取整到每10%为一个等级，<10%的应尽量细化。
8.2提交入选样本染色代表性彩色图片，并对染色特点包括组织形态、染色强度和背景染色特点进行简要评述。
9.临床试验方案
体外诊断试剂临床试验应按照同一临床试验方案在多家临床试验机构开展，且保证在整个临床试验过程中遵循预定的方案，不可随意改动。整个试验过程应在临床试验机构的实验室内并由该实验室的技术人员操作完成，申报单位的技术人员除进行必要的技术指导外，不得随意干涉试验进程。
试验方案应确定严格的入选/排除标准，任何已入选的样本被排除出临床试验都应记录在案并明确说明原因。在试验操作过程和结果判定时，应采用盲法以保证试验结果的客观性。各临床试验机构选用的对比方法应保持一致，以便进行合理的统计学分析。
应以图表的形式对试验总体设计及工作流程进行描述。图表中应包括连续切片的数量及用途分配等。
试验方案中应明确阅片者、操作者的选择标准。阅片者应选择在免疫组织化学和乳腺癌病理诊断中有丰富经验的病理科医生。
临床试验前申请人应对临床试验机构参与人员进行相关技术培训，并采用统一判读标准等手段，保持各临床试验机构的判读一致性。
在整个试验中，试验用体外诊断试剂和对比试剂都应处于有效的质量控制下，最大限度保证试验数据的准确性及可重复性。临床试验研究方案中应明确内部质控的方法及配合用阴性质控试剂的详细信息。
10.临床试验小结和报告
根据《体外诊断试剂临床试验技术指导原则》的要求，临床试验报告应对试验的整体设计及各个关键点给予清晰、完整的阐述，应对整个临床试验实施过程、结果分析、结论等进行条理分明的描述，并应包括必要的基础数据和统计分析方法。
